SDS-PAGE 条带定量分析

上传凝胶图像 → 框选 Marker 泳道与目标泳道 → 自动识别条带并计算相对浓度与纯度占比

凝胶图像 & 泳道选择

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支持 JPG / PNG,建议使用扫描或拍摄清晰、无过曝的凝胶图
操作提示:先点击"①框选 Marker 泳道",在图上拖拽出 Marker(蛋白 Ladder)所在泳道的矩形区域(建议从加样孔下方到染料前沿); 再点击"②框选目标泳道"框选待测样品泳道 —— 系统会自动锁定其上下边界与 Marker 一致,以保证迁移率 (Rf) 可比。 然后点击"检测条带",并按需调整灵敏度滑块使识别的条带数与实际一致。

目标泳道结果

目标泳道灰度剖面

完成 Marker 校准并检测目标泳道条带后,结果(估算分子量、灰度面积、纯度占比、绝对浓度)将显示在此处。

Marker 校准

Marker 泳道灰度剖面(自上而下,深色条带 = 波峰)

检测条带后,请在下表中按从上到下的顺序输入各条带对应的已知分子量 (kDa),用于建立 Rf–logMW 校准曲线。

在下方 Marker 条带表格中,用单选按钮勾选作为浓度参考的那一条带(默认自动选中面积最大/最亮的条带);填写该条带的已知浓度与 Marker 实际上样体积,并在右侧"目标泳道结果"中填写样本的总上样体积后,结果会按条带积分面积与参考带直接成比例,换算出每条条带的绝对浓度 (ng/µL,数值上等同 µg/mL)。
说明:本工具基于图像灰度密度法(densitometry)进行半定量分析:条带纯度 = 该条带灰度面积 ÷ 该泳道总灰度面积; 绝对浓度则以 Marker 中已知浓度的参考条带为"内标",按条带积分面积与参考条带直接成比例换算出目标条带在原始样本中的浓度 (ng/µL); 分子量为基于 Marker 建立的 Rf–log(MW) 线性回归估算值。 结果受染色方式、曝光/拍摄条件、条带拖尾与重叠等因素影响,仅供实验参考,不能替代质谱或标准品定量等精确方法。