倒数第一条oligo与倒数第二条oligo靠末端互补序列相互退火,经过第一次PCR循环,双链延长,延长的双链与倒数第三条oligo继续退火、延长,......,依此类推,理论上有N条oliogs就至少需要经过N个PCR循环,就能得到全长序列,依此为模板进行PCR扩增即可得到目标片段。