原理

可以使用PCR扩增获得新载体框架，也可以通过酶切获得线性载体，再用携带突变碱基的引物扩增突变片段，最后通过同源重组一次性获得目标突变体。该方法不适合4个以上的氨基酸突变，超过4个建议分次构建或者用重叠延伸PCR获得突变基因后连入载体。